总三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒（定量）用于人血清和血浆中总T3的体外定量检测

【前言简介】

科润达生物代理的这款试剂盒是进口试剂盒，用于检测样本中的总三碘甲状腺原氨酸（T3），血清三碘甲状腺原氨酸浓度的测定通常被认为是诊断甲状腺功能异常的有价值工具。这一重要性为过去20年发生的分析方法学的重大改进提供了动力。单一特异性抗血清的出现和阻断剂对T3结合血清蛋白的发现，使得发展简单的放射免疫分析成为可能。

【检测原理】

总三碘甲状腺原氨酸（T3）ELISA试剂盒是基于竞争结合原理的固相酶联免疫吸附试验（ELISA）。

微量滴定板上包被有多克隆山羊抗小鼠抗体。标准品、质控品和患者血清与含有抗T3的单克隆抗体的分析试剂一起孵育。在后续的孵育过程中，患者样品的内源性T3与T3辣根过氧化物酶缀合物竞争有限数量的固相结合位点。孵育后，将未结合的共轭物洗掉。

结合过氧化物酶结合物的量与样品中T3的浓度成反比。添加底物溶液后，显色强度与患者样品中T3的浓度成反比。

【检测方法】

试剂准备

洗涤液：洗涤液加入蒸馏水，制成洗涤液，充分混匀。

检测步骤

总三碘甲状腺原氨酸检测试剂盒（定量）检测前，所有试剂和样本需在室温平衡30min，试剂混匀并避免起泡。一旦实验开始，所有步骤不能被打断。注意更换枪头，避免污染。孵育步骤严格按照时间和温度进行。

1）取所需数目的板条。

2）将标准品、质控品和样品分别50μl加入到相应的微孔中，注意更换枪头。

3）每孔加入50ul分析试剂，混匀10秒钟，这步骤很重要。

4）室温（18-25℃）温育30分钟。

5）在每一微孔中加入50μl酶联物，轻轻振板混匀10秒钟，混匀步骤很重要。

6）室温（18-25℃）温育30分钟。

7）弃取孔内反应液，每孔用300μl稀释好的洗涤液洗板5次。最后在吸水纸上拍干除去残余液体。清洗过程的正确与否对测定结果的灵敏度和精密度有很大影响。

8）在每一微孔中加入100μl TMB底物液。

9）室温（18-25℃）温育10分钟。

10）在每一微孔中加入100μl终止液以终止底物反应。

11）加终止液后10分钟内450nm处读取OD值。

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