褪黑激素科研试剂盒-深圳市科润达生物工程有限公司

利用的是竞争法的原理。生物素和非生物素标记的抗原竞争性结合包被板上有限的抗体结合位点。生物素抗原结合到抗体上的量与样品中抗原的量成反比。系统达到平衡后，洗板除去游离的生物素抗原，结合到抗体上的生物素抗原可以用抗生物素碱性磷酸酶标记物和对硝基苯磷酸底物检测出来。用已知的标准品数据做一条标准曲线，将未知样品的酶活性与标准曲线进行比较就可以定量出未知样品的量。

组成成分：

数量	标记	成分
1×12×8	MTP	微孔板，微孔中包被了抗兔IgG（羊，多克隆）。
3×2ml	BIOTIN LYO	褪黑激素生物素，冻干，内含稳定剂。
3×2ml	ANTISERUM LYO	褪黑激素抗血清，冻干粉，内含抗血清（兔，多克隆）和稳定剂。
1×250ul	ENZCONJ CONC	酶联物，80倍浓缩，内含碱性磷酸酶标记的抗生物素抗体（羊）、Tris缓冲液和稳定剂。
1×6×2ml	CAL A-F LYO	标准品A-F，冻干粉，内含稳定剂，提取浓度请见试剂瓶标签或QC质控品。
1×2×2ml	CONTROL 1+2 LYO	质控品1+2，冻干粉，内含稳定剂，浓度/可接受范围请见试剂瓶标签。
1×100ml	WASHBUF CONC	洗涤液，10倍浓缩，内含磷酸缓冲液
32×13ml	PNPP SUBS	PNPP 即用
1×15ml	PNPP STOP	PNPP终止液，即用，内含1M的NaOH和0.25M的EDTA。
2×10	EXTRCOL	提取柱，即用，C18 RP，1cm3/100mg。另需提取柱可从IBL定购（编号：KEME761）
3×	FOIL	封板纸

所需材料（未提供）

1）移液器，体积：50; 500ul

2）试管（12×75mm）

3）轨道振荡器（400-600rpm）

4）旋涡混合器

5）带储器的8道移液器

6）洗涤瓶，自动或半自动洗板机

7）离心机（冷冻离心机更适宜）：100-200×g，也可选用多头抽真空装置（例如：Mallinekrodt-Baker 或Waters）。

8）甲醇（HPLC级）

9）蒸发离心机

10）可在405nm处读数的酶标仪（参考波长600-650nm）

11）蒸馏水或去离子水

12）吸水纸、取样吸头和计时器

储存条件：

必须在2-8℃的环境下运输和储存，避免太阳直射。样品的储存与稳定性及试剂准备将在相关章节中阐述,如果将包被板密封并储存于2-8℃的环境下时,试剂在有效期内稳定。用甲醇洗提后的提取柱可用于其它样品的提取或储存于2-8℃的环境下。提取柱可重复使用4次。

样本要求：

血清，血浆（EDTA，肝素）

按照静脉穿刺的常规注意事项采集样品，血液样品自采集到实验时都必须保证其化学完整性。不要使用明显溶血、黄疸和脂血样品。混浊的样品应当在实验开始前离心以除去所有的颗粒性物质。
储存	2-8℃	≤-20℃	≤-70℃	避免太阳直射，避免反复冻融。
稳定性	24小时	3个月	1年	避免太阳直射，避免反复冻融。

检测方法：

注意	用于96人份检测色试剂盒成分可分成3次进行。下列所述体积为检测32人份时所需要的量。

冻干或浓缩成分的准备：

稀释/溶解	成分		稀释剂	比例	备注	储存	稳定性
15ml	洗涤液	150ml	双蒸水	1：10		2-8℃	8周
	标准品和质控品	2.0ml	双蒸水		静置15min，混合时避免气泡	≤-20℃	直至有效期
	褪黑激素生物素	2.0ml	已稀释的洗涤液		静置15min，混合时避免气泡	临时配置,只能使用一次
	褪黑激素抗血清	2.0ml	蒸馏水		静置15min，混合时避免气泡
70ul	酶联物	5.6ml	已稀释的洗涤液	1:81
10ml	未稀释甲醇	100ml	蒸馏水	10%(v/v)

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